技術(shù)文章
Technical articles材料準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備好凝膠材料(瓊脂糖或聚丙烯酰胺)。
準(zhǔn)備電泳緩沖液(如TBE或TAE)。
準(zhǔn)備待分析的樣品(DNA、RNA或蛋白質(zhì))。
溶解凝膠材料:
根據(jù)需要稱(chēng)取適量的瓊脂糖或聚丙烯酰胺。
將其加入緩沖液中,加熱至溶解。
倒入模具:
將溶解后的凝膠倒入電泳模具,插入梳子以形成樣品孔,待凝膠固化。
去除梳子:
凝膠固化后小心取出梳子,形成樣品孔。
放置凝膠:
將凝膠放入電泳槽中,確保其與緩沖液接觸。
加入緩沖液:
在凝膠上方和槽內(nèi)加入適量的電泳緩沖液,確保樣品孔被覆蓋。
準(zhǔn)備樣品:
將樣品與上樣緩沖液混合,準(zhǔn)備加樣。
加樣:
使用移液器將樣品小心地加入到樣品孔中,避免樣品混入相鄰孔。
連接電源:
確保電源與電泳儀連接正確。
設(shè)置電壓:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)置適合的電壓(一般為80-150 V)。
啟動(dòng)電泳:
打開(kāi)電源,觀察電泳過(guò)程中的樣品遷移情況。
監(jiān)測(cè)樣品的遷移,適時(shí)記錄電泳時(shí)間。
電泳結(jié)束后,關(guān)閉電源,小心取出凝膠。
染色:
根據(jù)需要使用染色液(如EB或SYBR)染色樣品。
成像:
使用成像設(shè)備記錄電泳結(jié)果。
安全性:
確保電源線無(wú)損壞,避免接觸水分,操作時(shí)注意電氣安全。
樣品量:
加樣時(shí)避免過(guò)量,以免影響分離效果。
緩沖液:
確保緩沖液配比正確,以保證分離效果的可靠性。
電泳時(shí)間與電壓:
根據(jù)樣品類(lèi)型和凝膠厚度選擇合適的電泳時(shí)間和電壓,避免過(guò)度電泳導(dǎo)致樣品擴(kuò)散。
觀察進(jìn)度:
在電泳過(guò)程中,適時(shí)觀察樣品的遷移情況,確保實(shí)驗(yàn)進(jìn)展符合預(yù)期。
凝膠處理:
在取出凝膠時(shí)小心,避免損壞凝膠結(jié)構(gòu)。
遵循以上使用方法和注意事項(xiàng),可以有效提高電泳實(shí)驗(yàn)的成功率和結(jié)果的可靠性。