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Technical articles在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的傳代和收獲是日常工作的重要環(huán)節(jié)之一,而酶消化是這一過(guò)程的關(guān)鍵步驟。Gibco TrypLE™ Select 酶 (1X),無(wú)酚紅,500 mL (產(chǎn)品編號(hào)12563029)是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞解離的酶制劑。本文將詳細(xì)介紹該產(chǎn)品的特點(diǎn)、應(yīng)用、操作方法,以及其在細(xì)胞培養(yǎng)中的優(yōu)勢(shì)和重要性。
Gibco TrypLE™ Select 酶是一種替代傳統(tǒng)胰蛋白酶(Trypsin)的重組酶,專(zhuān)為哺乳動(dòng)物細(xì)胞的溫和解離而設(shè)計(jì)。這款酶制劑不含動(dòng)物來(lái)源的成分,消除了胰蛋白酶帶來(lái)的動(dòng)物源污染風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)保持了高效的細(xì)胞解離能力。TrypLE™ Select 酶的溫和作用不僅有助于維持細(xì)胞表面蛋白的完整性,還能減少細(xì)胞損傷,使其成為細(xì)胞培養(yǎng)中的理想選擇。
產(chǎn)品名稱(chēng): Gibco TrypLE™ Select 酶 (1X),無(wú)酚紅
規(guī)格: 500 mL
產(chǎn)品編號(hào): 12563029
品牌: Gibco
Gibco TrypLE™ Select 酶是由重組技術(shù)生產(chǎn)的,不含任何動(dòng)物來(lái)源成分。這一特性顯著降低了因動(dòng)物源污染帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn),特別適用于對(duì)無(wú)菌性和純凈度要求細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),如生物制藥和基因治療的細(xì)胞生產(chǎn)過(guò)程。
該產(chǎn)品不含酚紅,這一特性使其特別適合敏感實(shí)驗(yàn),如熒光顯微鏡觀察和細(xì)胞活力測(cè)定。無(wú)酚紅配方還避免了酚紅在某些實(shí)驗(yàn)中可能產(chǎn)生的干擾,提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
TrypLE™ Select 酶具備溫和但有效的解離能力,能夠在較短時(shí)間內(nèi)解離細(xì)胞,同時(shí)保持細(xì)胞膜和表面受體的完整性。與傳統(tǒng)的胰蛋白酶相比,TrypLE™ Select 酶在37°C下可以長(zhǎng)時(shí)間使用,而不會(huì)失去活性或過(guò)度損傷細(xì)胞。
傳統(tǒng)的胰蛋白酶在使用后需要用血清或?qū)S靡种苿┲泻停苑乐钩掷m(xù)消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。而TrypLE™ Select 酶在消化完成后無(wú)需中和,只需通過(guò)移除酶溶液即可停止消化過(guò)程。這一特性簡(jiǎn)化了操作步驟,減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,并降低了因中和步驟不當(dāng)引起的細(xì)胞損傷風(fēng)險(xiǎn)。
Gibco TrypLE™ Select 酶經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,保證每批次產(chǎn)品的活性和穩(wěn)定性一致。這種一致性對(duì)于需要高重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果的研究至關(guān)重要,尤其是在工業(yè)化生產(chǎn)和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中。
Gibco TrypLE™ Select 酶適用于多種細(xì)胞類(lèi)型的解離和傳代操作。以下是其常見(jiàn)應(yīng)用領(lǐng)域:
TrypLE™ Select 酶廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的傳代操作,包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。其溫和的解離作用減少了細(xì)胞表面蛋白質(zhì)和受體的損傷,使其在保持細(xì)胞功能的同時(shí),實(shí)現(xiàn)高效的細(xì)胞解離。
在原代細(xì)胞培養(yǎng)中,TrypLE™ Select 酶被用于從組織塊中解離出單個(gè)細(xì)胞。與傳統(tǒng)胰蛋白酶相比,它能夠更溫和地處理組織,減少細(xì)胞損傷,提高細(xì)胞的存活率和后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功率。
由于其不含動(dòng)物成分的特點(diǎn),TrypLE™ Select 酶特別適合用于生物制藥過(guò)程中的細(xì)胞培養(yǎng)操作,確保生產(chǎn)過(guò)程中的高純凈度和安全性。這對(duì)于基因治療、疫苗生產(chǎn)和單克隆抗體的工業(yè)化生產(chǎn)尤為重要。
在CRISPR基因編輯和其他細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)中,TrypLE™ Select 酶用于解離和處理工程化細(xì)胞,確?;蚓庉嫼蟮募?xì)胞能夠保持高活性和正常功能。
預(yù)熱酶液: 在使用前,將TrypLE™ Select 酶預(yù)熱至37°C。
去除培養(yǎng)基: 從細(xì)胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中吸除培養(yǎng)基,使用無(wú)菌PBS(磷酸鹽緩沖液)輕輕沖洗細(xì)胞兩次,以去除殘留的血清和培養(yǎng)基成分。
添加TrypLE™ Select 酶: 加入足量的TrypLE™ Select 酶溶液,確保覆蓋細(xì)胞層。
孵育: 將培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶放入37°C的培養(yǎng)箱中孵育。孵育時(shí)間因細(xì)胞類(lèi)型和密度而異,通常為2-10分鐘。可以通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞的解離情況,確定適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間。
終止消化: 當(dāng)細(xì)胞開(kāi)始脫落時(shí),輕輕敲擊培養(yǎng)皿或瓶體,促進(jìn)細(xì)胞脫落。然后吸除酶液,添加含有血清的培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞,血清中的蛋白質(zhì)成分將中和殘留的酶活性。
收集細(xì)胞: 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中,離心(通常1000 rpm,5分鐘)收集細(xì)胞,然后重新懸浮于新鮮培養(yǎng)基中。
存儲(chǔ)條件: TrypLE™ Select 酶應(yīng)儲(chǔ)存在2-8°C環(huán)境中,避免冷凍。
使用期限: 在適當(dāng)存儲(chǔ)條件下,產(chǎn)品的使用期限為瓶身標(biāo)注的有效期內(nèi)。確保每次使用后立即密封瓶蓋,避免產(chǎn)品長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。
TrypLE™ Select 酶作為傳統(tǒng)胰蛋白酶的替代品,提供了更高的安全性和可靠性。無(wú)動(dòng)物源成分不僅減少了污染風(fēng)險(xiǎn),還符合嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn),特別適合GMP環(huán)境下的應(yīng)用。
與胰蛋白酶不同,TrypLE™ Select 酶在使用后無(wú)需中和,這簡(jiǎn)化了細(xì)胞解離的操作流程,減少了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的步驟,降低了操作時(shí)間和成本。
TrypLE™ Select 酶對(duì)細(xì)胞表面蛋白質(zhì)和受體的溫和處理,使其特別適合需要高活性和低損傷的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。這對(duì)于免疫學(xué)研究、細(xì)胞功能分析和高通量篩選等實(shí)驗(yàn)尤為重要。
Gibco品牌保證了TrypLE™ Select 酶在生產(chǎn)中的高度一致性,這對(duì)于需要高重復(fù)性和可靠性的研究和生產(chǎn)過(guò)程具有重大意義。實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)用戶(hù)可以依賴(lài)該產(chǎn)品的穩(wěn)定性和高性能來(lái)確保實(shí)驗(yàn)成功。
TrypLE™ Select 酶已被廣泛應(yīng)用于全球眾多科研機(jī)構(gòu)和生物制藥公司,在免疫細(xì)胞研究、腫瘤學(xué)、干細(xì)胞研究和基因治療中取得了顯著成果。其性能和操作簡(jiǎn)便性得到了用戶(hù)的。
例如,在免疫細(xì)胞治療研究中,TrypLE™ Select 酶被用于溫和地解離T細(xì)胞和NK細(xì)胞,確保細(xì)胞表面抗原的完整性和功能性,極大地提高了細(xì)胞治療的效果和安全性。
Gibco TrypLE™ Select 酶 (1X),無(wú)酚紅,500 mL(產(chǎn)品編號(hào)12563029)是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中理想的酶解離試劑。其無(wú)動(dòng)物源成分、溫和的細(xì)胞解離能力和簡(jiǎn)化的操作流程,使其成為傳統(tǒng)胰蛋白酶的替代品。無(wú)論是在基礎(chǔ)研究、臨床應(yīng)用還是生物制藥中,TrypLE™ Select 酶都能為用戶(hù)提供可靠的性能和優(yōu)異的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果您的實(shí)驗(yàn)室需要一種高效、安全且操作簡(jiǎn)便的細(xì)胞解離酶,Gibco TrypLE™ Select 酶將是您的選擇。